Pemeriksaan Hitung Sel Darah Manual

PERHITUNGAN JUMLAH SEL-SEL DARAH

Prinsip : jumlah sel dalam 1 mm3 darah dihitung dengan jalan mengencerkan dengan larutan tertentu dan berdasarkan volume yg sudah diencerkan ini dalam kamar hitung


Specimen: darah vena/ kapiler dgn AK EDTA, heparin atau camp. oksalat


1. Hitung leukosit Manual
Alat:
1. pipet thoma eri dgn aspiratornya
2. lart.pengencer leukosit
     a. acetic acid 2% (V/V)
     b. hydrochloric acid 1% (V/V)

     c. lart. Turk (dpt melarutkan sel2 lain juga sbg pewarnw inti leukosit): 
         - acetic acid glacial 3 ml
         - lart. Gentian violet 1% 1 ml
         - Aq add 100 ml
3. kapas kering 
3. mikroskop
4. hemocytometer (kamar hitung)
perhitungan :
jml leukosit dalam 4 kotak = L
jml volume 4 kotak = ( 1x1x 0,1)mm3 x 4 = 0,4 mm 3
0,4 mm3 = L
1 mm3 = L : 0,4 = 2,5 L
Darah diencerkan = 20 x 
Jadi dalam 1 mm3 darah penderita = 2,5 L x 20 = 50 L
Atau : jml leukosit dalam 1 mm3 darah penderita = jml leukosit dalam 4 kotak kamar hitung dikalikan 50
Ukuran normal: sangat relative coz tgt beberapa hal, umumnya 4-10 ribu/mm3 darah
Diatas normal:leukositosis, dibawah normal: leukopeni


Catatan:
a) dalam kasus tertentu mis penderita leukemia dgn jml leukosit diatas 10 ribu/mm3, pengenceran dpt dilakukan 100 kali dengan pipet pengencer eritrosit
b) jika jml leukosit kurang dari 3 ribu/mm3 pengenceran diperkecil mjd 10x agar lebih teliti
c) perhitungan sel harus segera selesai sebelum d=cairan dlm kamar hitung menguap sebagian
d) factor kesalahan cara ini ±15%


2. Hitung Eritrosit Manual
Perbedaan dgn hitung eri:
1. Lart pengencer harus bersifat isotonis agar eri tidak lisis
    Lart. Pengencer;
    a. lart. hayem
        sodium sulfat 2,50 gram
        sodium chloride 0,5 gram
        mercury chloride 0,25 gram
        Aq add 100 ml
    b. lart, gower
        sodium sulfat 12,5 gram
        acetic acid glacial 33,3 ml
        Aq add 200 ml
    c. PZ
2. pengenceran sebanyak 200x dgn menggunakan pipet pengencer eritrosit
3. perhitungan 
Volume 1 kotak untuk hitung eri = 0,2 x 0,2 x 0,1 mm3 0,004 mm3
Volume 5 kotak = 5 x 0,004 mm3 = 0,02 mm3
Jml eri dalam 5 kotak = E, maka dalam 1 mm3 cairan mgd 1 : 0,02 x E = 50 E
Pengenceran darah = 200x , maka jml eri dalm 1 mm3 darah = 200x500 E= 10000E
Atau, “jml eri dalam 1 mm3 darah = jmleri dlm 5 kotak perhitungna dikalikan 10000”


Catatan:
a. perhitungan harus segera selesai sebelum cairan dalam kamar hitung mongering sebagian
b. dalam keadaan tertentu mis polycythemia, jml eri sgt tinggi shg sulit dihitung. Diatasi dgn pengenceran darah dibuat lebih tinggi mis dgn memipet darah sampai tanda 0,3 lalu diencerkan sam[ai tanda 101 maka pengenceran mjd 333x
c. penderita anemia, jml eri sgt rendah shg pengencrean cukup 100x 
d. bila saat px dgn lart hayem darah mengalalmi aglutinasi maka [x harus fiulang dgn lat PZ atau lart,gower. Biasanya ini terjadi pada penderita hiperglobulinemia
e. kesalahan cara in ± 20%
ukuran normal jml eri:
dewasa wanita ; 3,6-5 juta/mm3 darah
dewasa pria ; 4,2-5,4 juta/mm3 darah
saat lahir:5-6,5 jiuta/mm3 darah


3.hitung Trombosit Rees-Ecker
Prinsip: darah diencerkan dgn lart yg mengandung brillian creasyl blue shg trombosit berwarna biru cerah. Perhitungan didasarkan pd pengenceran & volume cairan dlm kamar hitung
specimen: darah vena / kapiler dgn AK EDTA
reagen lart pengencer rees ecker:
na sitrat 3,8 gram
kristal BCB 0,1 gram
formalin 40% 0,2 ml
Aq 100ml

a. secara langsung
prosedur sama dgn hitung eritrosit, tapi setelah sample dimasukkan dlm kamar hitung. Kamar hitung diletakkan dlm ruangan lembab menggunakan petridish dgn dasar kertas saring basah selam 15 menit
pengamatan dibawah mikroskop dgn perbesaran 40x, jml trombosit yg dihitung adalah trombosit yg berada pd 4 petak hitung leukosit.
perhitungan :
jml trombosit dalam 4 kotak = T
jml volume 4 kotak = ( 1x1x 0,1)mm3 x 4 = 0,4 mm 3
0,4 mm3 = L
1 mm3 = L : 0,4 = 2,5 L
Darah diencerkan = 200x karena pakai pengenceran eritrosit. Jadi dalam 1 mm3 darah penderita = 2,5 L x 200 = 500 L
Atau : jml leukosit dalam 1 mm3 darah penderita = jml leukosit dalam 4 kotak kamar hitung dikalikan 50o
b. secara tidak langsung
jumlah trombosit ditentukan melalui pemeriksaan apusan darah, dimana jml trombosit dihitung dlm 1000 sel eri & juga menghitung eritrosit dlm kamar hitung.
Jml trombo = T : 1000 x 5juta (misal jml eri dlm kmr hit)
Ukuran normal: 150ribu – 350 ribu per mm3 darah