Tehnik Pembuatan Test Sel

Teknik pembuatan

Test Sel A Standar , Test Sel B Standar, Test Sel O Standar

  

Dalam penetapan golongan darah sistem ABO, pemeriksaan yang dilakukan adalah memeriksa antigen pada sel darah merah dengan Antisera -A dan Antisera –B ( Sel grouping), dan memeriksa antibody didalam serum dengan Test sel A Standar, test sel B Standar dan test sel O standar ( Serum grouping ).

Test sel A,B,O standar, adalah reagensia untuk pemeriksaan golongan darah sistem ABO 

didapat dari beberapa individu darah donor yang sehat ( bebas uji saring IMLTD)

1. Bahan :

Darah lengkap dengan anticoagulant  CPDA atau EDTA ( dalam anticoagulant ini darah dapat disimpan sampai 3 minggu)

Ø  Untuk Test sel -A standar  

Terdiri dari 1 (satu) golongan A  

Ø  Untuk Test sel -B standar

Terdiri dari 1 (satu) golongan B

Ø  Untuk Test sel -O standar

Terdiri dari 3 (tiga) golongan O yang dipool

Ø  NaCL 0,9 % ( suspensi sel dipergunakan 1 hari )

Ø  Alserver ( suspensi sel dipergunakan sampai dengan 15 hari )

2. Peralatan :

-      Centrifuge standar blood bank

-      Tabung reaksi

-      Pipet plastik

-      Labu Semprot

-      Botol reagensia berlabel ( Test sel –A Standar/ Test sel –B Standar/ Test sel –O Standar)

3. Mencuci sel darah merah :

Sel - Sel A, B, dan O yang diketahui, harus dicuci lebih dahulu dengan saline 3 kali   

sebelum dijadikan “ TEST SEL STANDAR”.

n  Kedalam sebuah tabung kita isikan sel darah pekat ( setelah dipisahkan serum/plasmanya) ± 8 tetes.

n  Campurkan saline kedalam tabung sampai ± ¾ volume tabung atau sebanyak 10 bagian atau lebih salinenya dari pada sel yang dicuci.

n  Dengan pipet plastik isi tabung diaduk agar sel tersuspensi merata dalam saline.

n  Tabung di centrifuge ± 3000 rpm. selama 2 menit.

n  Dengan pipet plastik supernatant salinenya dihisap dan dibuang.

n  Ulangi pencucian ini sebanyak 3 kali.

n  Supernatant saline setelah pencucian terakhir dibuang sebanyak-banyaknya dan akan diperoleh sel pekat (100%) yang sudah dicuci.

n  Setelah dicuci kita buat suspensi selaku Test cells dengan persentase  kepekatan menurut kebutuhan

n  Masukkan sel-sel yang telah disuspensi kedalam botol reagen, beri label sesuai isi botol, tanggal pembuatan serta  tanggal kadaluarsa

n  Lakukan validasi reagensia test sel A,B,O dengan Anti-A & Anti-B

n  Catat dalam buku pembuatan  Reagen dan validasi reagensia

4. MEMBUAT SUSPENSI SEL

n  Untuk mendapatkan reaksi yang optimal dalam reaksi Antigen - Antibodi golongan darah, sel - sel harus disuspensi didalam saline atau media lainnya dengan percentase kepekatan tertentu.

n  Suspensi 5%    =   5/100, yaitu  5 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.

n  Suspensi 10% = 10/100, yaitu  10 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.

n  Suspensi 40% = 40/100, yaitu  40 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.

n  Suspensi 50% = 50/100, yaitu  50 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.

Tabel Pembuatan suspensi sel darah merah

Suspensi	Prosentase	Perbandingan		Keterangan
		s.d.m pekat 100%	Saline 0,9%	Diperkecil
5%	5 : 100	5 tetes	95 tetes	1 :  19
10%	10 :  100	10 tetes	90 tetes	1 :  9
40%	40 : 100	40 tetes	60 tetes	2 : 3
50%	50 : 100	50 tetes	50 tetes	1 : 1

Catatan:

      Test sel O terdiri dari 3 individu, akan ada kombinasi antigen-antigen lain yang dapat

     bereaksi langsung dalam serum/plasma