Research Laboratory : Share all about laboratory and research laboratory

Pages

kumpulblogger

Wednesday, September 19, 2012

Tehnik Pembuatan Test Sel


Teknik pembuatan
Test Sel A Standar , Test Sel B Standar, Test Sel O Standar

  

Dalam penetapan golongan darah sistem ABO, pemeriksaan yang dilakukan adalah memeriksa antigen pada sel darah merah dengan Antisera -A dan Antisera –B ( Sel grouping), dan memeriksa antibody didalam serum dengan Test sel A Standar, test sel B Standar dan test sel O standar ( Serum grouping ).
Test sel A,B,O standar, adalah reagensia untuk pemeriksaan golongan darah sistem ABO 
didapat dari beberapa individu darah donor yang sehat ( bebas uji saring IMLTD)

1. Bahan :
Darah lengkap dengan anticoagulant  CPDA atau EDTA ( dalam anticoagulant ini darah dapat disimpan sampai 3 minggu)
Ø  Untuk Test sel -A standar  
Terdiri dari 1 (satu) golongan A  
Ø  Untuk Test sel -B standar
Terdiri dari 1 (satu) golongan B
Ø  Untuk Test sel -O standar
Terdiri dari 3 (tiga) golongan O yang dipool
Ø  NaCL 0,9 % ( suspensi sel dipergunakan 1 hari )
Ø  Alserver ( suspensi sel dipergunakan sampai dengan 15 hari )


2. Peralatan :
-      Centrifuge standar blood bank
-      Tabung reaksi
-      Pipet plastik
-      Labu Semprot
-      Botol reagensia berlabel ( Test sel –A Standar/ Test sel –B Standar/ Test sel –O Standar)

3. Mencuci sel darah merah :
Sel - Sel A, B, dan O yang diketahui, harus dicuci lebih dahulu dengan saline 3 kali   
sebelum dijadikan “ TEST SEL STANDAR”.
n  Kedalam sebuah tabung kita isikan sel darah pekat ( setelah dipisahkan serum/plasmanya) ± 8 tetes.
n  Campurkan saline kedalam tabung sampai ± ¾ volume tabung atau sebanyak 10 bagian atau lebih salinenya dari pada sel yang dicuci.
n  Dengan pipet plastik isi tabung diaduk agar sel tersuspensi merata dalam saline.
n  Tabung di centrifuge ± 3000 rpm. selama 2 menit.
n  Dengan pipet plastik supernatant salinenya dihisap dan dibuang.
n  Ulangi pencucian ini sebanyak 3 kali.
n  Supernatant saline setelah pencucian terakhir dibuang sebanyak-banyaknya dan akan diperoleh sel pekat (100%) yang sudah dicuci.
n  Setelah dicuci kita buat suspensi selaku Test cells dengan persentase  kepekatan menurut kebutuhan
n  Masukkan sel-sel yang telah disuspensi kedalam botol reagen, beri label sesuai isi botol, tanggal pembuatan serta  tanggal kadaluarsa
n  Lakukan validasi reagensia test sel A,B,O dengan Anti-A & Anti-B
n  Catat dalam buku pembuatan  Reagen dan validasi reagensia

4. MEMBUAT SUSPENSI SEL
n  Untuk mendapatkan reaksi yang optimal dalam reaksi Antigen - Antibodi golongan darah, sel - sel harus disuspensi didalam saline atau media lainnya dengan percentase kepekatan tertentu.
n  Suspensi 5%    =   5/100, yaitu  5 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.
n  Suspensi 10% = 10/100, yaitu  10 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.
n  Suspensi 40% = 40/100, yaitu  40 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.
n  Suspensi 50% = 50/100, yaitu  50 bagian sel pekat yang berada didalam 100  volume.

Tabel Pembuatan suspensi sel darah merah
Suspensi
Prosentase

Perbandingan

Keterangan
s.d.m pekat 100%
Saline 0,9%
Diperkecil
5%
5 : 100
5 tetes
95 tetes
1 :  19
10%
10 :  100
10 tetes
90 tetes
1 :  9
40%
40 : 100
40 tetes
60 tetes
2 : 3
50%
50 : 100
50 tetes
50 tetes
1 : 1

Catatan:
      Test sel O terdiri dari 3 individu, akan ada kombinasi antigen-antigen lain yang dapat
     bereaksi langsung dalam serum/plasma

No comments:

Post a Comment

Post a Comment

Followers