Thrombin Time

Thrombin Time
Untuk memeriksa fase ke-3 koagulasi, dgn mengukur fungsi fibrinogen. TT memanjang bila kadar fibrinogen dibwh 100mg% shg fungsinya menurun, juga bila terdpat penghambat trombin seperti heparin / produk fibrin yg tersendat2. normal pada bayi baru lahir& pada penderita multiple myelone


Prinsip: kedlm plasma ditambahkan thrombin dgn jml tttu. Waktu yg digunakan sampai tbtuk fibrin dilaporkn sbg waktu thrombin



Specimen: darah vena dgn AK EDTA, Na pksalat / Na citrate


Alat & reagensia:
1. stock thrombin 100 unit/ml
1 ampul bovine thrombin 5000 unitNIH(parked davis) lrutkn ke dllm 5 ml saline diluent. Tmbahkan 100mg BaSO4 kmudian inkubasi 37oC 20 menit.
Camp disentrifuge 5 menit 2500rpm, pisahkn supernatant dgn hati2, tambahkan 20 ml PZ& 25ml glycerin. Campur rata, simpan pd suhu 0oC, tahan beberapa bulan
2. tris buffer pH 7,5
- sigma 121 primary satandard biochemical buffer 6 gr
- NaCl 6,6 gr
- HCl 0,1 N 440 ml
Add aquadet 1000ml 


Prosedur:
1. darah [enderita disentrifuge 10 menit 2500rpm utk mendapatkan plasma miskin trombosit(PPP)
2. siapkn camp trombosit dgn buffer dgn komposisi:
0,1 ml stock trombin + 0,9 ml tris buffer. Inkubasi waterbath 37oC(stabil selama 20 menit)
3. siapkn pula 1-1,5 ml tris buffer, inkubasi dlm waterbath
4. pipet 0,2 ml plasma ke dlm tabung reaksi, tambahkan 0,2 ml tris buffer,campur, inkubasi waterbath selama 1 menit
5. tepat 1menit, tambahkan 0,2 ml camp thrombin-buffer, stopwatch dinyalakan
6. lidi batangan dimasukkan dlm tabung camp sebanyak 2 kali setiap 1 detik(sampai terbentuk bekuan yg menem[el pd lidi).stopwatch dimatikan, catat waktu sbg waktu thrombin
7. lakukan hal yg sama thd plasma control. Plasma penderita &plasma control diperiksa secara duplo, hasilnya dibuat rata2.
Nilai normal; 15-20 detik


Catatan:
1. selisih waktu antara tes dgn duplo tdk boleh lebih dari 1,5 detik
2. bila TT lebih dari 25 detik, maka ulangi pemeriksaan
Lrutkan & simpan pada suhu 40C